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【48812】何为内毒素?怎样检测?检测的含义是什么?
细菌内毒素,又称为“热原”,细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的特有结构,细菌在存活状况时不释放出来,只有当细菌逝世自溶时才释放到细胞外,体现多种毒性效果,为差异于外毒素而称之为内毒素。细菌内毒素是由脂多糖(
内毒素坐落细胞壁的最外层、覆盖于细胞壁的黏肽上。各种细菌的内毒素的毒性效果较弱,大致相同,可引起发热、微循环妨碍、内毒素休克及播散性血管内凝血等。内毒素耐热而安稳,抗原性弱。可影响机体发生抗体,但无中和效果,构成抗毒素,经甲醛处理不能成为类毒素。
20世纪60年代,人们发现一种陈旧的海洋生物,被称为“海洋活化石”的鲎,它的血液与内毒素触摸后会发生特异性的凝集反响,人们通过很多研讨和试验从它的血液中提取出了用于检测内毒素的“鲎试剂”。内毒素查验测验单位为EU/ml。
①凝胶法,将样本与鲎试剂在试管中混合,并运用干浴器,在37±1°C下,孵育60±2min,期间不要振荡。加热完成后,当即缓慢地将试管歪斜180°。假如凝胶已构成并能坚持其完整性而不变形或陷落,则成果可确定为阳性,而假如未构成凝胶则为阴性。在检测期间,关于一系列样本,要进行多倍稀释(一般为2倍),以查看每个样品的成果是否为阳性。确定为阳性的最大有用稀释倍数或最小浓度被称为结尾。
②脂多糖(LPS)的生物学符号的勘探分析法,尽管此类办法可以检测出样品中LPS的品种并且能灵敏地检测出样品中LPS的浓度,可是依然不能精确地检测出有生物学效果的内毒素浓度。
③酶联免疫测定法(ELISA),ELISA法是现在新式的内毒素检测的新办法,它是根据抗原抗体的酶联免疫测定法,由外加热原质影响巨噬细胞后发生的内热原物质如肿瘤坏死(TNF)因子白细胞介素1(IL-1)等而进行测定的。
④生物传感器检测法,生物传感器也是现在新式的内毒素检测的新办法,大部分仍是根据鲎试验法中鲎阿米巴法溶解产品与内毒素的LPS地凝聚反响。该类检测法具有丈量速度快、灵敏性高、最低检测限低一级特色,现在,国内外有较多对生物传感器检测内毒素的研讨。
细菌内毒素具有多种生物学活性,微量的内毒素进入机体将会呈现发热、血压下降、寒颤、引起DIC、内毒素败血症等一系列临床反响,因而内毒素快速定量检测,对临床对症医治具有很深的现实含义。
①内毒素检测不只有助于辨别是否为细菌感染,尤其是关于革兰阴性杆菌感染具有极端严峻的参考价值,还能提示感染严峻程度,可用于发热原因的快速辅佐确诊。
②有利于临床及早诊治疾病,为挑选用药供给必定理论按照,对病况进行动态监测,对给药后的效果及预后判别具有严峻含义。