咱们好呀～今日来学习兽医常识！ 前几个月，我与硕腾的兽医专家Alvaro博士聊过猪圆环病毒和肺炎支原体的。其间，Alvaro博士提到了新疫苗的点评，不过其时由于时刻有限，几句话便带过了。今日，咱们来接着这个论题打开，掰开了揉碎了聊一聊「猪圆环病毒和肺炎支原体疫苗」的点评。

　　今日的嘉宾是来自马来西亚的猪兽医专家，ChoewKong Mah博士。CK也来自硕腾，是公司世界运营部分的产品实效研讨总监。

　　「猪圆环病毒和肺炎支原体疫苗」的研制与点评，需求经过哪些重重关卡？一起来听听吧~

　　CK博士来自马来西亚，小时分 家里养过鸡也养过猪，还有一只陪同他16年的宠物狗狗~ 从小喜欢动物的他，在考大学时顺从其美地挑选了兽医专业。

　　1996年，CK取得马来西亚博特拉大学 (UPM) 兽医学位之后便参加拜耳作业。2000年，他参加Elanco（礼来公司），在这里作业了十年，在此期间，CK从马来西亚举家搬到了上海，积累了许多世界畜牧业商场、技能服务以及动保产品管理经验。 2010年，CK博士来到诺伟司，担任东亚区商场总监，担任动保和养分类产品的商场作业。2013年，他参加了硕腾，领导亚太区家禽商场团队，从2016开端，他担任世界运营部分的实效研讨总监至今。

　　CK: 养猪的同行们都有切身阅历，「猪圆环病毒」2型（PCV2）和「猪肺炎支原体」（MH）是今日养猪业里比较常见的病原体，假如没有操控好，便会让猪长时刻遭受缓慢呼吸道疾病的困扰。好在现在商场上，已经有多种PCV2和MH疫苗可供挑选了。不过，不同的疫苗之间，究竟饲养场和兽医们应该怎么点评和挑选呢？

　　浅显地讲，咱们判别一个疫苗好不好，首要看两方面：临床作用 + 性价比 --- 管用 + 合算嘛 。

　　1）安全性：好的疫苗应该对猪场作业人员、环境、动物都是安全的，更重要的是不会康复毒力（no reversion to virulence）

　　2）临床效能（clinical efficacy）：能否下降死亡率和发病率？能否削减病毒的传达、下降病毒载量（viral load）、削弱病毒散播才能（virus shedding）？能否减轻呼吸系统的临床症状、削减肺部损害的发生？

　　3）经济效益：经过对接种疫苗动物的日采食量、日增重、出栏周期和料肉比等出产功能目标进行剖析，来点评其经济效益。

　　4）田间数据：不论是已接种 vs. 未接种的动物间的比照，仍是不同疫苗间的比照，田间试验的一手数据对以上三个方面的疫苗点评特别重要。

　　表1：引起猪呼吸道疾病综合征的首要病原体（图片引自White, 2011）

　　那么，怎么保证和点评疫苗的安全性？以咱们最近的新疫苗产品「圆支二联苗」为例，来讲讲咱们是怎么做的吧~

　　1）去除过敏原（allergen）：在疫苗的出产中，有必要保证去除一切外来的过敏原，以防止这些过敏源对机体带来不必要的负面影响。因而，咱们的出产工艺里，有这么一个过程是经过「超微过滤」去除细胞，得到无菌的有用抗原，这些无菌的抗原蛋白是能够有用影响猪只发生相应的免疫应对的“功臣”；

　　2）运用层析技能：咱们知道，抗原是疫苗中最重要的成分 --- 可是支原体疫苗却往往含有许多PCV抗体 （这是由于支原体疫苗的培育需求许多用到猪血清，而猪血清中PCV抗体含量高），假如不去掉、仅仅简略地与PCV疫苗混合，PCV疫苗的效价就会遭到影响。

　　因而，在圆支二联苗出产过程中，还需求进一步运用「A蛋白亲和层析技能」（Protein A chromatography），意图是去除肺炎支原体培育液中残留的圆环抗体和其他一些IgG抗体。这项技能能够使得终究的疫苗产品愈加安全。

　　运用亲和层析技能，去除PCV抗体，使两种抗原成分能够兼容 （图片引自Zoetis)

　　3）佐剂（Adjuvant）的挑选：除了抗原之外，疫苗的安全性也受佐剂的影响，因而，做出一个好的疫苗有必要要挑选安全的佐剂。咱们运用了一种「水包油型」佐剂 (Metastim)，首要成分是角鲨烷、泊洛沙姆 121、和聚山梨醇酯。它在全球广泛运用于猪、牛、马等疫苗上，几十年的运用足以证明它的安全性。

　　4）安全性试验：当疫苗的成分确认、工艺确认，出产出制品后，还并没有万事大吉。在疫苗上市前，咱们需求在全球做许多安全性试验（要求10个动物试验！） --- 针对单一抗原、佐剂、二联苗，在不同区域、不同饲养环境、不同饲养阶段的猪群，乃至对人体是否有副作用都进行了试验（考虑到在接种时，不妥操作可能对作业人员带来的影响）。

　　试验点评的目标包含：接种部位的不良反应率、过敏反应、接种后体温等。终究的数据标明，无论是单剂仍是两剂接种，不良反应的发生率和生理盐水对照组没有明显差异，意味着接种部位的不良反应率极低，也没有发现过敏反应的发生，接种后猪只的体温也十分正常。有了这些数据，才能够证明疫苗的安全性啦~

　　CK: 接下来，咱们来讲讲「有用性点评」。在我看来，一个疫苗的有用性需求体现在三个方面：

　　1）免疫发生期（onset of immunity）：接种后多久开端发生免疫维护？

　　2）免疫维护继续期（duration of immunity）：接种后的维护能继续多久？

　　举个比方，在咱们的点评中，咱们用到了30头接种圆支二联苗的猪 + 30头对照猪进行攻毒试验，在21日龄接种疫苗后的第23周用PCV2攻毒，然后取器官样。成果显现，疫苗能够有用防备病毒血症、明显下降粪便排毒、削减淋巴组织中的病毒载量；这些目标标明，疫苗对猪只的免疫维护继续期长达23周。

　　为啥挑选断奶后23周攻毒呢？很简略，由于这是产品猪遍及出栏的周龄，试验这样规划，便是期望验证疫苗是否能够做到全程维护、直至产品猪出栏。

　　相同的，咱们在MH上也做了相似的攻毒试验，21日龄仔猪接种圆支二联苗和对照组各40头，在接种后第23周攻毒MH，对肺部病变、血清免疫等目标进行剖析，疫苗组的目标要明显优于对照组。

　　3）穿插维护（cross protection）：是否能够对不同毒株起到维护作用？

　　这是十分重要的一点，由于猪场面临的往往不是单一基因型毒株（比方PCV 2a, 或2b,或2d...），很可能是「混合毒株」，因而，好的疫苗应该对不同基因型毒株都有作用。

　　CK: 为什么要做攻毒试验？这是由于在点评疫苗的效能时，咱们有必要要看在真的面临病原体进犯时，接种疫苗的猪群的成长功能和健康会怎么被影响。

　　出于生物安全的考虑，咱们的攻毒试验都有必要在试验室等级的可控环境下展开。攻毒的方法即包含独自病原体（PCV2或MH），也包含双病原体（PCV2 + MH），来看互作效应。

　　从攻毒试验中得到的数据，是真正对兽医和饲养户有指导意义的数据。它能够协助咱们明晰地看到接种疫苗带来的免疫维护、成长功能和健康的改进程度、出栏数据的状况，然后点评一个疫苗是否真的能够为饲养户发明更多的赢利。

　　布景是这样的：全球范围内，PCV2疫苗在仔猪上的运用是很遍及的，最近这些年在母猪上的运用也越来越多。有研讨发现，3周龄的仔猪仍然能检测到PCV2的抗体，意味着这是「母源抗体」（maternal derived antibody），而这个时刻点正好又是仔猪需求接种疫苗的时分，那么问题来了，这些母源抗体是否会影响疫苗的接种呢？

　　咱们最近刚刚宣布了一篇总述，具体地剖析了这个问题。从已宣布的、相关的200多篇文章中，咱们选出了契合剖析条件的13篇文献、24个试验，经过荟萃剖析，发现在相对「高母源抗体水平」(≥ 8 log2 IPMA 抗体值）的状况下接种PCV疫苗，仔猪「血清转化」会遭到明显影响，但对成长功能（日增重和死亡率）或病毒血症（病毒血症阳性份额与病毒载量值）并没有明显影响。荟萃剖析标明，在3周龄接种一次疫苗，对即便有「高水平母源抗体」的仔猪仍然能有用维护；其首要的成长功能、病毒血症和血清转化参数体现都更为杰出。

　　在接种PCV2疫苗期间，比较含「高母源抗体水平」的仔猪群 vs. 含「低至中等母源抗体」水平的仔猪群在接种疫苗后的免疫作用；荟萃剖析成果标明，两组之间的首要成长功能和病毒血症影响的差异不明显。 （图片引自Nautrup et al., 2021）

　　这是咱们十分关怀的另一个问题。依据现有的研讨，我的答案是：给母猪接种MH疫苗会对仔猪是有利的。

　　已有研讨标明，给母猪接种MH疫苗能有用下降MH在母子代以及母猪之间的传达。一起，仔猪对MH感染的反抗首要是依托「细胞免疫」，而接种疫苗的母猪会将「细胞免疫」搬运给仔猪，对仔猪的维护更强。因而，在点评MH疫苗作用时，咱们不要只重视「体液免疫」抗体（humoral antibodies，IgG和IgM等），更应该重视细胞免疫。

　　CK: 首要来说说为什么会有「圆支二联苗」的呈现 --- 曩昔PCV和MH疫苗都是「单苗」（即针对一种特定病原体），虽然单苗能供给更灵敏的接种时刻，但是PCV2 和MH 疫苗最佳接种时刻都是在3周龄或断奶左右，因而饲养场和兽医们对「二联苗」的需求就日积月累，究竟二联苗的优势仍是很明显的--- 只需求打一针，操作便利、对动物体的应激小，削减在现场混合疫苗的过错几率，还能够节约人工成本，等等等等。

　　也正是由于二联苗的许多长处，现在越来越多的饲养户挑选运用二联苗。不过，运用二联苗，必定要注意挑选的二联苗的临床效能与单苗适当。

　　对产品猪而言，最便利的是3周龄一次一头份免疫。当然，咱们也能够依据本身猪场的实践状况，根据临床学、免疫学（酶联免疫吸附测定等）、支原体微生物测验来判别病原体的传达以及病理点评，并调查猪群的成长功能来判别PCV和MH疫苗是否有互作效应，来组织合适本身猪场的免疫程序。

　　关于后备母猪而言，在三周龄接种的基础上，主张在约5-6月龄来一针加强免疫，这样不只能下降种猪群内部的传达危险，还能下降母代向子代传达危险。

　　接种Fostera PCV MH后的产品猪儿们能够维护至出栏（图片引自Zoetis）

　　专业书籍：The Economics of Animal Health and Production《动物健康饲养经济学》（作者：Rushton Jonathan）（这是我老板送我的宝贵礼物，有6章节共300多页。咱们现在针对疾病的干涉，无论是疫苗仍是生物安全措施及医治，意图都是为饲养户削减丢失。我期望更多的饲养户和兽医能将经济学概念运用到实践饲养出产中）